آنزيمهاي محدود كننده يا اندونوكلئازها
تواليهاي برش يافته
آنزيمهاي محدود كننده يا اندونوكلئازها، به طور گسترده در زيستشناسي مولكولي به كار ميروند. در زير دو آنزيم اندونوكلئاز BamHI و BclI با منطقهي برش آنها ارايه شدهاست.
BamHI توالي زير را بعد از اولين G رشتهها را برش ميدهد.5’ GGATCC 3’3’ CCTAGG 5’BclI توالي زير را بعد از اولين T رشتهها را برش ميدهد. 5’ TGATCA 3’3’ ACTAGT 5’
5’ GGATCC 3’
3’ CCTAGG 5’
5’ TGATCA 3’
3’ ACTAGT 5’
سؤال
1- اگر آنزيم BamHI در توالي زير اثر داده شوند چند قطعه به وجود خواهد آمد؟5’ ATTGAGGATCCGTAATGTGTCCTGATCACGCTCCACG 3’3’ TAACTCCTAGGCATTACACAGGACTAGTGCGAGGTGC 5’
5’ ATTGAGGATCCGTAATGTGTCCTGATCACGCTCCACG 3’
3’ TAACTCCTAGGCATTACACAGGACTAGTGCGAGGTGC 5’
2- آنزيم BclI چطور؟3- اگر برشهاي به وجود آمدهي اندونوكلئازهاي BamHI و BclI با هم ادغام كنيم، چه توالي بوجود خواهد آمد؟ آيا آنزيمهاي BamHI و BclI ميتوانند در اين رشته برش به وجود آورند؟جواب1- دو قطعه5’ ATTGAG 3’ 5’ GATCCGTAATGTGTCCTGATCACGCTCCACG 3’3’ TAACTCCTAG 5’ 3’ GCATTACACAGGACTAGTGCGAGGTGC 5’
3’ TAACTCCTAG 5’ 3’ GCATTACACAGGACTAGTGCGAGGTGC 5’
2- دو قطعه
3’ TAACTCCTAGGCATTACACAGGACTAG 5’ 3’ TGCGAGGTGC 5’
3-
5’ ATTGAGGATCACGCTCCACG 3’3’ TAACTCCTAGTGCGAGGTGC 5’
از آنجا كه هيچ جايگاه برشي براي آنزيمهاي ذكر شده در اين توالي وجود ندارد لذا برشي هم نميتوانند بهوجود آورند.