در مطالعه‌ي جذب يون در فيبروبلاست‌هاي كشت شده از طريق آپوترانسفرين يكي از سلول‌ها دچار جهشي شده كه مانع از جذب آهن شده است. ما از ايمنوفلورسانس براي رنگ آميزي سلول‌هاي گيرنده‌ي ترانسفرين استفاده كرده و مشاهده كرديم كه گيرنده در هر دو سطح سلول و وزيكول‌هاي آندوسيتوزحضور دارد.
1- بر اساس اين داده‌ها كدام ويژگي‌هاي چرخه‌ي ترانسفرين در سلول‌هاي جهش يافته تغيير نكرده است؟
2- ژن گيرنده‌ي ترانسفرين را از سلول‌هاي جهش يافته كلن و توالي يابي مي‌كنيم. مشاهده مي كنيم كه گيرنده كاملا طبيعي است. همچنين مولكول‌هاي ترانسفرين در محلول كاملا طبيعي هستند. چه عامل ديگري مي‌توانسته باعث عدم جذب آهن شده باشد؟
1- گیرنده ها رونویسی، ترجمه و به طور صحیح به غشا منتقل شده است زیرا حضور آن با ایمنوفلورسانس تایید شده است. همچنین می دانیم که سلول ها قادر به آندوسیتوز هستند لذا کلاترین، آداپتین و دینامین ها سالم هستند (زیرا در وزیکول های آندوسیتوز گیرنده مشاهده می شود).
2- احتمالا سلول های جهش یافته قادر به کاهش PH در آندوزوم ثانویه نیست. محیط اسیدی آندوزوم ثانویه موجب جدا شدن Fe3+ از آپوترانسفرین می شود. در سلول های جهش یافته کمپلکس گیرنده-فروترنسفرین به غشا بر می گردند بدون اینکه Fe3+ جدا شده باشد، بنابراین سلول هرگز آهن را جذب نخواهد کرد. عدم توانایی سلول های جهش یافته در کاهش PH ممکن است در اثر کاهش فعالیت پمپ پروتونی یا کاهش فعالیت کانال Cl- رخ داده باشد. |